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PCR实验室设备整体解决方案来了!

点击次数:447  发布时间:2020-06-18

导读: 4月23日中央要求各地要结合疫情防控和检测需求,加强医疗卫生机构实验室建设。三级综合医院均应当建立符合生物安全二级及以上标准的临床检验实验室,具备独立开展新型冠病毒检测的能力;各级疾控机构和有条件的专科医院、二级医院、独立设置的医学检验实验室也应当加强实验室建设,提高检测能力。对医疗资源相对缺乏、检测能力相对薄弱、疫情防控压力较大的地区,特别是陆路边境口岸,要选择1家综合实力强的县级医疗机构予以重点支持,实现县域内医疗机构具备核酸检测能力。

 

     临床基因扩增实验又称 PCR实验,是专门用来检验艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一种检测手段。它可以通过将病毒体内所含的基因进行扩增的方法,测出一些病毒含量不高的感染者体内是否含有特定的病毒。由于该检测方法可以测出普通检验难以检测出的病毒并具有灵敏度高、特异性高、快捷、对样品要求低等优点,因此被临床医生广为认可,已广泛应用于医院的临床诊断和各防疫检测部门的禽疫病诊断。但是,这种实验需要有能保证绝对安全、配置合理的实验室和非常规范的操作为前提。近年来对临床基因扩增检验实验室的建设越来越得到重视,因为它对检测结果的可靠性、准确性和安全性起到至关重要的作用。本文主要从临床基因扩增检验实验室的平面布局,PCR实验室基本流程进行了介绍。

 

 

PCR实验室布局图

 

       PCR实验室原则上分为四个单独的工作区域:试剂制备区、样本制备区、核酸扩增区、产物分析区。为避免交叉污染,进入各个工作区域必须严格遵循单一方向进行,即只能从试剂制备区→样本制备区→核酸扩增区→产物分析区。各实验区之间的试剂及样品传递应通过传递窗进行。

 

 

PCR实验室基本流程

 

1.试剂制备区

 

      功能:主要是作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备,试剂和用于标本制作的材料应直接运送至该区,不得经过其它区域。试剂原材料需贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。

品类

选型用途 

推荐品牌

超净工作台

涉及对细菌的操作均需在超净工作台下完成

苏州安泰、博科

生物安全转运箱

待检标本的转运

上海飒凌

移液器

准确量取特定体积溶液20-100ul

赛多利斯

药品冷藏箱

短期保存

海信医用HC-5L75F  70L容积不占场地

试剂低温冰箱

可选2-8℃、-20℃、-86℃

海信医用 HC-5L360/HCD-25L210/HD-86L390、HD-86L830BP

混匀仪

移取样本前需要混匀

米欧

MIX-30S

迷你离心机

含反应混合液的瞬时离心

MINI-5k/8k/10k+

消毒车

空间环境消毒

申兴光电

灭菌锅

实验室物品、试剂、培养基消毒灭菌

SHANAN

天平(可选配)

试剂配重

奥豪斯


2.样本制备区

 

     功能:临床标本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时DNA的合成。

 

品类

选型用途 

推荐品牌

生物安全柜

为了防止有害悬浮微粒、气溶胶的扩散

上海力康/苏州安泰

高速离心机

浓缩法:高速离心过柱

米欧- MC-15 15000r/min

高速台式冷冻离心机

用于收集微生物菌体、细胞碎片以及其他沉淀物。有些样品由于在常温下不太稳定,需要低温环境。

Thermo DH18R

水浴箱

样本56度灭活

米欧WT100-2

移液器

准确量取特定体积溶液

赛多利斯

紫外灯/消毒车

空间环境消毒

申兴光电

混匀仪

移取样本前需要混匀

米欧-

MIX-3000

金属浴

用于DNA杂交过程中控温

杭州米欧DKT200-2

八连管离心机

PCR体系瞬时离心

米欧  mini5k/8k/10k+

 

3.核酸扩增区

 

    功能:主要是DNA扩增,已制备的DNA模板和合成的DNA和主反应混合液,制备成反应混合液等,也可以在本区域内进行。在PCR测定中,通常在扩增后须打开反应管。

 

品类

选型用途 

推荐品牌

荧光定量PCR仪

核酸定量分析

博乐/罗氏

核酸提取仪

样品DNA/RNA提取

硕世/天能

移液器

准确量取特定体积溶液

赛多利斯

紫外灯/消毒车

空间环境消毒

申兴光电

 

4.产物分析区

 

     功能:主要进行的操作为扩增片段的测定,如使用全自动封闭分析仪器检测,此区域可不设。

品类

选型用途 

推荐品牌

电泳仪

水平电泳用于核酸DNA/RNA检测,垂直电泳用于蛋白检测,转印电泳用于将蛋白转印到膜上做western检测

伯乐、勤翔

凝胶成像系统/紫外检测仪

用于核酸琼脂电泳和蛋白聚丙酰胺的观察和拍照;紫外分析仪用于染色后核酸琼脂电泳胶观察,不能连接电脑,

勤翔

电炉

电泳琼脂凝胶加热融化

一恒

    PCR实验室设备解决方案是上海飒凌科技针对需要建立PCR实验室的医院提供的整体解决方案,包括PCR实验室的搭建、设备配备及试剂的选择、检测方法的建立等。目前荧光PCR技术从发展趋势来看,是各级医院临床所迫切需求的一项先进诊断技术。开展荧光PCR诊断项目将有利于医院检验水平的进一步提高,为传染性疾病的诊断、预防、控制提供了一项新的有效准确的检测和控制手段。

     另一方面,对于要升级为三甲的医院,卫生部有硬性要求,必须具备规范化的PCR实验室,从这一方面来说,PCR实验室的建设对于医院的建设具有重要的意义。

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