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PCR仪的反应包括三个主要步骤

点击次数:355  发布时间:2022-06-21
 简单的说,PCR仪就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内InVitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR仪,实时荧光定量PCR仪四类。  
分别是1.Denaturation2.Annealingofprimers,3.Extensionofprimers。所谓Denaturing乃是将DNA加热(至90~95℃)变性,将双股的DNA加热后转为单股DNA以做为复制的模板.而Annealing则是令Primers于一定的温度下(冷却至55~60℃)附着于模板DNA两端。*后在DNA聚合酶e.g.Taq-polymerase的作用下(加热至70~75℃)进行引物的延长Extensionofprimers及另一股的合成。  
PCR的*早设想核酸研究已有100多年的历史,本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术,Korana于1971年*早提出核酸体外扩增的设想:“经过DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。
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